Nikon Laser Tirf System

Инновационная конфокальная система

Лазер, работающий на эффекте TIRF, разработанный Nikon — это новейшее комплексное решение в области систем визуализации изображений затухающих волн, такое же удобное и простое в использовании, как и обычный флуоресцентный микроскоп.

Обеспечивает визуализацию активности отдельной молекулы в живых клетках

Быстрозатухающие волны, образующиеся в результате полного внутреннего отражения, вызывают возбуждение флуоресцентных молекул в оптическом срезе, толщиной обычно менее 100 нм, без выхода молекул из образца.

Излучение быстрозатухающих волн создает настолько высокое отношение сигнал/шум, что становится возможным наблюдение активности отдельной молекулы в живых клетках, в местах контакта с покровным стеклом.

Функциональные особенности конфокальной системы Laser TIRF System

Интеграция с флуоресцентным модулем

Недавно разработанная лазерная система TIRF-2 включает лазерную систему TIRF и флуоресцентный модуль с эпископическим осветителем в единый блок. Исследователи могут изучать одну и ту же область, используя оба метода наблюдения, флуоресценции, основанной на полном внутреннем отражении (TIRF) и флуоресценции с эпископическим осветителем, с помощью затвора, перекрывающего световой поток. Все операции по настройке и юстировке системы очень просты.

Сверхвысокое отношение сигнал/шум позволяет производить наблюдения за отдельными молекулами

Благодаря сверхвысокому отношению сигнал/шум лазерной системы визуализации Nikon TIRF, становится возможным проводить наблюдения за отдельными молекулами. Благодаря разработанному Nikon механизму подавления шума Noise Terminator, система может создавать захватывающие сверхкачественные изображения с высоким отношением сигнал/шум.

Образец: YFP-рецепторы нейромедиатора в дисперсных гиппокампальных нейронах в первичной культуре.

Снимки любезно предоставлены д-ром Chieko Nakda, Университет г. Киото и профессором Shiego Okabe, Университет медицины и стоматологии г. Токио

Расширяемая конструкция

Благодаря модульной расширяемой конструкции инвертированного микроскопа TE2000 можно включить в состав микроскопа лазерную систему TIRF со стандартным флуоресцентным модулем или с высокоточной системой W-TIRF, системой «белого» света «white light» TIRF и косого освещения, при этом также возможна установка «системы идеального фокуса» или дополнительных устройств визуализации наблюдаемых изображений.

Многофункциональные возможности исследований и визуализации

Объединение системы TIRF лазерным сканирующим модулем для конфокальной микроскопии представляет собой мощную комбинацию устройств, позволяющую проводить исследования быстроразвивающихся процессов в клеточных мембранах в дополнение к трехмерной визуализации изображений глубоких внутренних слоев клеток и тканей с чрезвычайно высоким отношением сигнал/шум.

Конфокальная лазерная сканирующая система TIRF-C1

Система TIRF-C1 позволяет проводить наблюдение объектов различными способами с помощью лазерной системы TIRF, конфокального и флуоресцентного лазера. Данная конфигурация может стать мощным инструментом для исследований, позволяя анализировать все процессы, происходящие на уровне клеточных мембран живых клеток и следить за их развитием глубоко внутри клеток.

Освещение быстрозатухающей волны

Объективы TIRF Nikon с большой числовой апертурой, фокусируют лазерный луч на объект наблюдения под углом падения большим, чем критический угол (8с), что возбуждает флуоресценцию меток, основанную на эффекте полного внутреннего отражения, в виде быстрозатухающих волн в непосредственной близости от раздела поверхности покровного стекла – образца.

Быстрозатухающая волна проникает в образец максимум на несколько сотен нанометров, и ее энергия уменьшается экспоненциально.

В лазерной системе TIRF, разработанной Nikon, используется этот эффект быстрозатухающих волн для возбуждения одиночных молекул в тонком слое, прилегающем к покровному стеклу.

Поскольку флуоресцентно помеченные клетки образца не возбуждаются за пределами распространения быстрозатухающей волны, такая система визуализации может создавать флуоресцентные изображения с чрезвычайно высоким отношением сигнал/шум.

Планапохроматические объективы CFI для исследований TIRF

• CFI Апохромат TIRF 60х H/1.49 (левый);
• CFI Апохромат TIRF 100х H/1.49 (правый).

Данные объективы являются первыми в мире объективами с масляной иммерсией, в которых установлено корректировочное кольцо для защиты объектива от влияния температурных изменений и толщины покровного стекла.

Поворачивая кольцо, исследователь может легко устранить негативное влияние сферической аберрации на качество изображения, возникающее вследствие температурно-индуцированных изменений показателя преломления иммерсионного масла и влияния изменений толщины покровного стекла.

Калибровка объективов проводится для диапазона температур от 23? С (комнатная температура) до 37? С (физиологическая температура).

Кроме того, эти объективы создают великолепные изображения при наблюдении по методу дифференциально-интерференционного контраста, флуоресценции, конфокальной микроскопии и обратной свертки изображения (деконволюции), сохраняя захват изображения во время исследований с применением лазерных пинцетов.

Метод интерференционного контраста, основанный на поверхностном отражении (SRIC) позволяет обнаружить фокальную точку до переключения на режим TIRF

Поскольку быстрозатухающая волна распространяется приблизительно в пределах 100 нм от поверхности стекла, при наблюдениях по методу TIRF необходимо, чтобы образец контактировал с покровным стеклом, в противном случае изображение TIRF не будет получено.

При использовании метода интерференционного контраста, основанного на поверхностном отражении (SRIC) все участки, прилегающие к стеклу становятся видимыми в черном цвете, что дает возможность пользователям установить, насколько плотно прилегает исследуемый образец к покровному стеклу перед началом наблюдений по методу TIRF.

Поскольку при проведении данных исследований не используется возбуждающее излучение, повреждение образца сводится к минимуму, и пользователи имеют достаточно времени для выполнения самого исследования. Компания Nikon разработала систему интерференционного контраста, основанного на эффекте поверхностного отражения (SRIC), которая может быть использована как с лазером TIRF-2, так и с системой "белого» света TIRF. Исследования по методу SRIC также просты, как переключение специальных светофильтров.

Снимки любезно предоставлены д-ром Masaya Hashido, университет г. Токио.

Лазерный осветитель безопасен и прост в использовании

Для соответствия требованиям стандартов по лазерной безопасности на лазерных затворах установлены блокировочные механизмы. Для защиты глаз пользователя от лазерного облучения через окуляры, лазерный затвор не срабатывает и излучение не генерируется, если оптический путь в бинокуляр открыт.

Спецификации Laser TIRF System